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使用PR Panta进行稳定性分析以构建更有效的基因治疗载体

开发一种基因治疗载体时,我们需要数据确保对治疗载体的血清型制剂有保证,这来自于您是否选择了最理想的配方条件,以及这个制剂是否是纯的,并知道它携带了多少遗传物质。因为治疗载体的生产是一个低产量和高成本的过程,我们通常面临着需要在没有太多样本的情况下获得所有这些数据。
Panta 能够通过少量样品为您提供有关载体的详细信息,其提供的清晰、易于分析的稳定性表征结果可帮助您真正了解 AAV。
Prometheus right view instrument image

PR Panta 为您提供分析基因治疗载体所需信息

在一次实验中检测载体的热稳定性、载量和纯度,为您节省样品用于其他实验。

测试得到的载体稳定性表征的高质量数据,使您能够为后续开发做出正确判断。

通过智能软件的分析,让您能够得到直观的数据加快决策进程。

通过稳定性表征改进基因治疗载体效果

无论是处于开发早期,优化基因治疗载体,或是关注长期质量评估, Panta 都可以通过稳定性参数进行筛选,揭示您的基因治疗载体生物物理特性。

AAV血清型分型

nanoDSF热稳定性分析可以让您在AAV生产方案中确认批次间的相似性。此外,了解生产变化如何影响样品的整体热稳定性。

制剂配方优化

通过nanoDSF和Backreflection技术帮您筛选出能够提供最佳稳定性的制剂。缓冲液或病毒颗粒蛋白稳定突变的变化会影响产品冷藏的时间以及它们传递基因有效载荷的效率。

样品纯度监测

DLS可以展示制品的纯净度,您可以放心使用高质量的产品。不充分的纯化过程可能导致不必要的副产品,进而导致基因治疗产品的效力降低。

载体载量检测

nanoDSF 和 SLS 技术都可用于载体携带的遗传物质数量监测。 开发有效的治疗载体不仅需要优化其衣壳,还需要确定它是否具有必要的基因有效载荷。

衣壳组装验证

SLS 确定的粒子的分子量,以确保它们正确组装。 正确组装的 AAV 是生产基因治疗产品所必需的。

载体储存条件确认

储存条件会影响基因治疗载体的功效。Panta 允许您在工作流程每个步骤中进行对比,确保您得到的是高质量、稳定的产品。

借助四种集成检测技术,使您能够深入了解您的基因治疗样本

第一次,在单一的实验中,由一个完整的热变曲线过程就可以监测所有这些技术的样品的热稳定性和纯度

动态光散射 (DLS)

获取有关矢量大小和纯度的信息

微量差示扫描荧光法(nanoDSF)

对载体进行血清型检测并优化其稳定性

背反射技术(Backreflection)

监测大聚集体的形成

静态光散射技术(SLS)

找到载体的分子量来监测它们所包含的遗传物质的数量

看看PR Panta提供的参数,及它们如何助力基因治疗载体表征

微量差示扫描荧光技术(nanoDSF)

热变性

Tm (for 330 nm, 350 nm, and ratio)

Melting temperature, or point at which 50% is unfolded; higher Tm values represent more thermostable candidates

Tonset (for ratio)

展开起始温度;较晚的起始温度表明更大的稳定性

Ea(*parameter derived from data)

展开活化能

Reversibility of unfolding

展开时发生不可逆性的点

动态光散射 (DLS)

粒径(rh)分析

Tsize

平均粒径开始增加的温度 这个参数与载体是否泄漏,以及整体衣壳稳定性有关

累积量或粒径分布/正则化分析
rH

流体动力学半径是指溶剂化状态下粒径的大小

PDI

PDI指数代表大小群体的分布,可以用来确定样品制备的纯度

自相互作用分析
kD

扩散相互作用可以确定蛋白展开的起始以及对胶体稳定性的影响,倾向于自结合的粒子在储存过程中更容易聚集

静态光散射技术(SLS)

分子大小信息

分子量

溶液中所有颗粒的平均分子量

自缔合和聚集倾向
Tscattering

散射强度开始改变的温度表明尺寸和聚集增加

B22

第二个维里系数用于推断较高浓度下的自聚集行为

背反射技术(Backreflection)

聚集

Tturbidity

大的不规则聚集体产生时的起始温度

同时检测使实验更高效

当您的样本量有限但需要测量多个参数时,获得能够做出有效但合理决策的结果会变得更加复杂。

Prometheus Panta measures multiple parameters — Tm, Tturbidity, aggregation, and PDI — simultaneously, throughout a single thermal ramp. And it does this all while using just a few µL of sample, so you can save more for other downstream assays.
Become more efficient with simultaneous measurements four graphs with black, blue, and purple lines, temperature x-axis

高质量的数据源于仪器的高精密度

高精度的光学检测器可以更好地检测样品荧光,从而获得更精确、准确的数据。

Prometheus Panta captures precise Tm values ± 0.1 °C while other instruments offer values that vary as much as ± 1.5 °C. It has an unmatched resolution of ± 0.008 for F350/F330 ratios, which allows you to see even the most subtle unfolding events.

对于光散射, Panta检测重复性同样无与伦比。

样品加载到与加热元件直接接触的毛细管中,从而在整个升温过程中实现精准的温度控制。

请确信您正在使用具有精确,高分辨率数据的最佳质量矢量

Panta 提供高质量的数据,以确保您始终可以得到可靠结果。

控制软件可以提供模块化的实验设计,以便您筛选大量载体。同时您也可以选择单一的检测模块或者整合其中的几个模块来获取您的AAV的完整的生物物理表征信息。

软件可以实现关键参数的轻松排序,并定制的清晰可视界面显示数据, 使您能够快速获取测试结果; 数据支持以多种格式导出,方便您记录在实验室电脑中或在会议上展示。

Gradient spot

欢迎了解更多PR Panta的信息