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动态光散射 (DLS)

动态光散射(DLS)是一种生物物理表征技术,用于评估生物样品的胶体稳定性。

它利用粒子在溶液中的运动来确定大分子的大小有多均匀,以及样品中粒径大小的分布。

DLS是许多研究人员在治疗领域的一个有价值的工具

DLS is a useful tool for anyone developing 生物制品 or gene therapies. Complex biological samples such as enzymes, monoclonal antibodies, or AAVs that will be used for treatments must be highly stable for storage, transport, and clinical administration.

DLS能够监测样品的胶体稳定性。此信息可帮助您通过更改序列或缓冲环境来优化样品,并测量这些更改如何影响胶体稳定性。

将DLS测量应用于治疗性生物开发的许多方面,包括:
  • 在表达和纯化过程中
  • 处方前研究阶段
  • 可开发性评估
  • 缓冲液配方及优化
  • 放大或工艺变更期间的可比性研究。
Nano-Workflow-Graphic-DLS Nano-Workflow-Graphic-SLS backreflection cycles steps from target selection to investigational new drug approval arrow

DLS提供对样品稳定性的洞察

Colloidal stability indicates how likely a sample is to clump up or aggregate and crash out of solution, rendering it useless and potentially harmful. DLS provides two critical parameters about your sample: PDI and rH.
多分散性指数 PDI

PDI, or the Polydispersity Index, is a value that reflects how much variation is present in your sample. A PDI close to zero means a single, tightly-folded species that is highly regular between individual particles. As the PDI increases, it indicates that your macromolecules are imperfectly folded, aggregating, or contain contaminant particles.

Hydrodynamic radius, rH
Hydrodynamic radius, rH, is the average size of particles within a given population. Assuming a single population, changes to buffer environment, covalent modifications, and binding of small molecules or proteins all impact the rH of your sample. Particle-sizes@4x

DLS根据溶液中粒子的运动来生成样品的信息

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ACF fit good data@4x graph with Autocorrelation y-axis

ACF和ACF适用于两种不同的样品,含有不同大小的珠粒的单一种群。衰减函数随溶液中粒子的大小而变化。

Intensity peaks good samples@4x Size Distribution graph with Radius and Intensity Distribution axes

由ACF拟合数据计算出的每个粒度的叠加粒度分布图。虚线表示每个种群的累积半径。请注意,累积半径与大小分布峰很好地对齐,代表单个紧密折叠的种群。

粒子以不同的速度运动,并根据它们的大小散射不同数量的光。较大的粒子比较小的粒子移动更慢,散射更多的光。DLS光学非常灵敏,可以测量样品光的强度波动。

自相关函数(ACF)捕获有关散射光波动的信息。将衰减数据绘制出来,并通过数据拟合一条线——ACF拟合。这种拟合在数学上被转换成图表,这些图表传达了溶液中粒子平均大小的信息,以及给定样本中粒子大小的分布。 

您可根据样品的质量使用不同的拟合模型。只包含单一粒子群的样品使用累积半径拟合。有多个种群存在的那些更适合于大小分布拟合。

Raw ACF data graph with Tau and Amplitude axes

图中展现的是具有多个不同大小粒子的样品ACF数据(黑色曲线),包括size distribution拟合(青色)和cumulant radius拟合(蓝色)。

Intensity peaks bad sample size distribution graph with radius and Relative Frequency axes

粒径分布图显示了样本内不同大小的种群(实线)。单个种群的拟合的累积半径同样在图上显示 (虚线)。

将DLS添加到您的工作流程中,以了解更多关于基于蛋白质的治疗样品的信息

PR_Panta front instrument view

PR Panta提供了包括DLS技术在内的蛋白质优化组合方法。了解更多关于仪器和它的工作原理。

PR_Panta front instrument view
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