温度依赖的荧光强度变化 TRIC
温度相关强度变化（TRIC）是一种基于荧光的生物物理技术，用于量化分子相互作用的强度。
TRIC 的原理是，当目标分子与配体相互作用时，与目标分子结合的荧光团周围的化学环境会发生变化，从而导致荧光强度的变化。 在 TRIC 测量过程中，会对检测处样品用红外激光来进行简短且精准的加热，从而使温度升高来放大与配体结合量相关的荧光强度变化。
用于药物发现已有 10 多年的历史
TRIC 是 微量热泳动（MST）的组成部分，MST 是 NanoTemper 十多年前首创的一项技术，通过玻璃毛细管直接在靶标和配体混合物的溶液中测量亲和力。或者，当在微孔（Dianthus 仪器中使用的样品容器）中进行测量时，热泳动信号被屏蔽，仅使用TRIC进行测量。
由于荧光的变化取决于整体化学环境，因此需要使用对这些变化敏感的荧光团来标记目标分子。任何靶标分子或配体都可进行标记，包括蛋白质、核酸或小分子。
TRIC 已成功应用于测量下列与分子的相互作用：
- 膜蛋白
- 固有无序蛋白
- DNA核酸适配体
- 小分子片段
在药物发现中使用 TRIC 进行初步筛选和亲和力筛选
The affinity between two molecules tells you how tightly they bind to each other. Affinity measurements are reported as the affinity constant, equilibrium dissociation constant, or Kd. The Kd and affinity are inversely related. The Kd value is related to the concentration of one of the binding partners and so the lower the Kd value — lower concentration expressed in molar values — the higher the affinity between the two molecules.
从事药物开发的科学家使用 TRIC 和 Spectral Shift 来筛选小分子或片段化合物库，以找到那些与致病蛋白质结合并在细胞水平上抑制其负面影响的分子或片段。该技术还用于蛋白质降解剂二元和三元复合物的表征。
获得对配体诱导聚集的亲和力和深入了解
In a TRIC assay, the molecule you label with the fluorophore is called a target. The other binding partner — another protein, nucleic acid sequence, small molecule, or fragment — is called a ligand. To calculate the Kd, a constant amount of the fluorescently labeled target is mixed with a dilution series of a ligand. The recorded changes in fluorescence are plotted against the logarithmic ligand concentration to build a binding curve. The Kd is determined from the binding curve using the law of mass action.
此外，当 TRIC 用作正交方法时，还可为您提供有关配体诱导聚集的信息。聚集非常常见，特别是对于不溶性片段和具有疏水性基团的小分子，这通常是使用其他技术无法确定结合亲和力的原因。
使用 Dianthus 将 TRIC 添加到您的药物发现工作的流程中
