タンパク質の品質は一貫した結果を得るための鍵となります
ほとんどの場合、実験のいくつかのステップを進行させてから矛盾する結果が出るまでは、何かが間違っていることを認知できません。実験開始する前にサンプルの品質を簡単に確認できたらどうでしょう? そこで Tycho の登場です。
Tycho はタンパク質の品質 について色々教えてくれます
Tycho は一度の実験でタンパク質の存在、純度、濃度、機能性そして類似性についての情報を提供します。これらを簡単に測定し、タンパク質が構造的に無傷か、適切にフォールディングされているかを判断できます。
ネイティブな条件下で分析
サンプルをラベリングしたり修飾する必要はありません。それはアッセイ開発が不要になり、リアルな結果が得られることを意味します。
数分で結果を得る
わずか 3 分で有益なデータを作成します。それは次に何をすべきかを決断することを容易にします。
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あらゆるタンパク質サンプルタイプを簡単にテスト
透析やサンプル希釈などは忘れてください。広範囲の濃度にわたって、あらゆる種類のバッファー中のあらゆるタンパク質の品質を測定します。
限られたベンチスペースを節約
Tycho のコンパクトさは場所を占有しません。実験室のあなたのスペースが広くなります！
貴重なサンプルを保存
あなたがサンプルを使い果たしたのでタンパク質を精製することは🤦♂️orまたは🤦♀️のようなものです。タンパク質の品質をチェックすることで、後から実験パラメータを少なくすることができるけでなく、必要なサンプルは10 µLだけです。
I put every protein in Tycho first. The data is very reproducible in our hands. Just mix your samples, put the capillaries in and 3 minutes later you have your results. It’s the only equipment I would recommend to anyone working on proteins because there are no downsides in having a Tycho.
Dr. Stefan Gajewski
Scientist I, Nurix Inc., California
ついに日常的に出くわす質問への 答えを得る
不純物がこれらの疑わしい結果を引き起こしているか？
このタンパク質のバッチは最後のものと同質か？
これらのサンプルは正しく保存されたか？
タンパク質はその機能を失ったか？
アッセイに適切な量を使用したか？
Is there even any protein in this sample prep? ?
塩、pH、バッファーはタンパク質に影響を与えているか？
ワークフローのどの段階でもタンパク質の品質を確認
初期精製
タンパク質の存在をチェックします
クロマトグラフィーステップ
単離されたタンパク質を含む画分を特定し、その機能を確認します
タンパク質精製
バッチの相同性、純度、機能性、濃度を確認します
サンプル保存
正しいバッファー格納条件を決定してください。解凍後の類似性、純度、機能性、濃度を保存前のデータと比較します
アッセイ開発
あなたのタンパク質の濃度をチェックして、それが機能的であるか、あるいは活性を持っているかどうかテストします
多くの種類のサンプルを測定
抗体
キナーゼ
多量体な複合体
転写因子
膜タンパク質
標識タンパク質
点突然変異
酵素
ウイルス様粒子（VLP）/キャプシド
機能化タンパク質（mAbs）
その他
実用的な日常のアプリケーションに Tycho を使用してください
冷蔵庫、冷凍庫、または -80℃に最適な保管条件を特定する
X線結晶構造解析の前に、サンプルの品質を確認
サンプルが NMR 実験に適した品質であることを確認する
精製工程中のタンパク質の存在を監視する
クライオ EM 前にサンプルの品質をチェックする
単離されたタンパク質の量とその濃度を決定する
迅速かつラベルフリーで結合相互作用を調べる
バッファーレシピを開発またはテストする際に、塩、pH、およびイオンの影響を監視する
アッセイ開発を支援するために、タンパク質の品質に関する素早い洞察を得る
Tycho NT.6 was adopted by all our lab members in no time, providing crucial quality information not detectable before. It will become a standard tool for everyone working on protein biochemistry.
Dr. Gregor Witte
Principal Investigator, K.P. Hopfner lab, Ludwig-Maximilians-University of Munich
Tychoはサンプルの品質をどのように識別しますか？
Tycho は、タンパク質の構造的完全性（またはフォールディング性）を調べることによってタンパク質の品質を検証します。温度勾配が適用されると、タンパク質中のトリプトファンおよびチロシン残基からの、350 nm および 330 nm の両方で検出される固有の蛍光の変化が測定されます。蛍光シグナルにおけるこれらの変化は、タンパク質のフォールディング状態における遷移を示します。転移が起こる温度は、変曲点温度（Ti ）と呼ばれます。蛍光度はサーマルランの間に測定され、比率とプロットされそしてＴi を算出するために使用されます。 実行中のシグナルの変化（Δratio）と共にその初期値も記録します。
開始時のサンプルの品質やバッチ間の相同性を確認
Tycho を使用して、新しいサンプルの構造的完全性または展開プロファイルを適切な品質の参照サンプルと比較して、それらが相同していることを確認します。それが異なる場合は、汚染物質を含む低品質のサンプルである可能性があります。これは、さらに精製する必要があるか、精製ワークフローを最適化する必要があるかを示しています。常に最高品質のサンプルを使っているという自信があると、より一貫した結果が得られます。
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サンプルの存在、量、純度を確認
Tycho の測定結果を従来な測定法の結果と比較すると、Tycho の結果はタンパク質の存在を認識するだけでなく、不純物が存在する場合にもそれを認識します。そして、それの濃度を測定することさえ可能にします。そのため、将来的には、時間がかかり、貴重なサンプルを大量に使用するような従来の方法は使用しないでください。
保管またはアッセイ開発に適した バッファーレシピを決定
Tycho を使用して、タンパク質の品質を維持するための保存条件、またはアッセイ開発に適したバッファーレシピを特定します。タンパク質サンプルに適した条件を特定するために、さまざまなバッファー、添加剤、賦形剤、または保存温度、保存期間などをすばやくスクリーニングします。この情報を使用して、将来の実験のアッセイ条件を最適化できます。結局、不要なタンパク質のバッチを生産するのにかかる時間が節約できます。
機能性をすばやく確認
Tycho は 3 分で機能性を評価し、あなたのタンパク質が他の分子と相互作用しているかどうかを教えてくれます。これは非常に少ないサンプルでラベリングなしで測定されるため、従来の方法よりはるかに簡単です。そのため、出来るだけ早めのこの測定方法の入手をお勧めします。
タンパク質の品質を初期から知る
モノクローナル抗体治療の開発中、できるだけ早く構造の整合性を認知することは、機能性と潜在的な薬効を示す最も有力な指標の一つです。
モノクローナル抗体 (Herceptin) を二つの酸化条件で処理し、サンプルの品質に対する酸化の効果を観察するために Tycho を使用しました。初期比の測定結果によって示されたより、長い酸化処理は、より多くの mAb のアンフォールディングを引き起こしました。加えて、酸化処理の増加は、検出された第一の変曲温度の左シフトを引き起こし、タンパク質中の特定のドメインに対する構造変化の可能性があることを示唆します（左）。酸化処理がハーセプチン結合親和性に及ぼし得る効果を確認するために、マイクロスケールサーモフォレシス (MST) を適用しました（右）。
どんどん測定する
Tycho を使うのはとても簡単です。ただ画面上の指示に従って実験を始めてください。データ整理のために、実験の実行中にサンプルに名前を付けてください。それが終わったら、生データ、自動的に分析された結果、そして要約された数字のすべてを便利ですぐに共有できるフォーマットでエクスポートするだけです。
少量のサンプルで十分
Tycho と微量のサンプルを使っていろいろたくさん（あるいは最小限）のことができます。正確に製造された小型のガラスキャピラリーを使用して正確な結果が得られるので、分析は事実上あらゆる種類のサンプルで行うことができます。サンプルは毛管力によってキャピラリーに引き込まれるため、ピペッティングは不要です。貴重なサンプルを無駄にすることはありません。
Tycho のご紹介、3 分ですべてが変わります
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